TAILIEUCHUNG - Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3

Nhƣng trong một số trƣờng hợp, tế bào vi khuẩn vẫn nguyên vẹn mà phage cũng không sinh sôi. Hiện tƣợng này có thể do một trong hai nguyên nhân là DNA phage gắn vào vi khuẩn dƣới dạng không hoạt động trong một thời gian hay DNA phage bị một hệ thống bảo vệ của vi khuẩn tiêu diệt khi vừa mới xâm nhập, hệ thống bảo vệ này là các enzym cắt giới hạn. Đây chính là hiện tƣợng giới hạn. Khi nghiên cứu DNA phage bằng phƣơng pháp Southern blot, ngƣời ta thấy rằng DNA phage. | đến hàng triệu bản sao chúng sẽ phá vỡ tế bào vi khuẩn. Nhung trong một số truờng hợp tế bào vi khuẩn vẫn nguyên vẹn mà phage cũng không sinh sôi. Hiện tuợng này có thể do một trong hai nguyên nhân là DNA phage gắn vào vi khuẩn duới dạng không hoạt động trong một thời gian hay DNA phage bị một hệ thống bảo vệ của vi khuẩn tiêu diệt khi vừa mới xâm nhập hệ thống bảo vệ này là các enzym cắt giới hạn. Đây chính là hiện tuợng giới hạn. Khi nghiên cứu DNA phage bằng phuơng pháp Southern blot nguời ta thấy rằng DNA phage trích từ vi khuẩn bị phá vỡ có kých thuớc nguyên vẹn trong khi DNA phage trích từ vi khuẩn không bị phá vỡ lại bị cắt thành những đọan nhỏ hơn kých thuớc đã xác định. Tuy vậy ngay trên những chủng kháng phage vẫn có một số vi khuẩn bị phân hủy. Các phage do số ít vi khuẩn này phóng thích có khả năng phân hủy chủng vi khuẩn truớc kia còn kháng phage. Tất cả những hiện tuợng nêu trên là kết quả của một hệ thống gồm hai enzym Các enzym cắt giới hạn cắt DNA phage ở những vị trí chuyên biệt luôn luôn tạo thành những đọan có kých thuớc nhất định và Methylase là enzym chịu trách nhiệm gắn nhóm methyl vào A hay C ở vị trí cắt của các enzym cắt giới hạn. Khi A hay C đuợc methyl hóa enzym cắt giới hạn không còn nhận biết đuợc vị trí cắt. DNA vi khuẩn không bị chính các enzym cắt giới hạn của chúng cắt là nhờ cơ chế này. Các enzym cắt giới hạn hợp thành hệ thống bảo vệ ở tế bào procaryote chua có hệ thống nào tuơng đuơng đuợc phát hiện ở eucaryote. Khái niện enzym cắt Enzym cắt giới hạn là các endonuclease có khả năng thủy giải DNA mạch đôi một cách lặp lại ở những trình tự xác định. Dựa vào khả năng này nguời ta chia ra làm 3 loại enzym cắt giới hạn Loại 1 khi enzym nhận biết đuợc trình tự nó sẽ di chuyển trên phân tử DNA đến cách đó khoảng 1000-5000 nucleotide và giải phóng độ khoảng vài chục nucleotide. Loại 2 enzym nhận biết trình tự và cắt ngay tại vị trí đó. Loại 3 enzym nhận biết một trình tự và cắt DNA tại vị trí cách đó khoảng 20 nucleotide. Trong các thí

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.