TAILIEUCHUNG - Proteomics Human Diseases and Protein Functions Part 6

Tham khảo tài liệu 'proteomics human diseases and protein functions part 6', khoa học tự nhiên, công nghệ sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | 114 Proteomics - Human Diseases and Protein Functions Materials and methods Tissue cultures All of the cell cultures were maintained at 37oC and 5 CO2 in a humidified cultured chamber. C2C12 myoblasts ATCC and D122 Lewis lung carcinoma cells gift from Lea Eisenbach were cultured in DMEM medium supplemented with 10 FBS and penicillin streptomycin. Two stably transfected cell lines were produced from D122 using a expression vector. D122v3B harbor the empty vector while D122aa4 cells overexpress the full length BRE Chan et al. 2005 . D122v3B and D122aa4 were maintained in DMEM plus 10 FBS and 400 mg mL of G418 Invitrogen Immortalized human esophageal epithelial SHEE cell line and the malignantly transformed esophageal carcinoma cell line SHEEC were cultured in DMEM medium plus F-12 Nutrient Mixture 1 1 supplemented with 10 FBS GibcoBRL and penicillin streptomycin Shen et al. 2000 . Chang cells ATCC CCL-13 were cultured in Minimum Essential Medium Eagle plus 10 FBS. Transgenic mice The transgenic mice were generated carrying the full-length BRE gene and the transthyretin TTR promoter. The TTR promoter is specifically expressed in hepatocytes in the liver Ching et al 2001 . All mice were maintained in the Laboratory Animal Services Centre Chinese University of Hong Kong. Ethical approval has been obtained from the animal ethics committee Chinese University of Hong Kong before performing the animal experiments. Subcellular fractioning of soluble proteins SHEE and SHEEC cells were extracted in lysis buffer 8M Urea 2M Thiourea 2 CHAPS TBP NP-40 containing protease inhibitors GE Healthcare . After extraction the lysates were incubated on ice for 30 min and then centrifuged at 8000 rpm for 15 min to remove all cell debris. The fractions cytosol membrane and nucleoplasm were obtained using a ProteoExtract Subcellular Proteome Extraction Kit Calbiochem following instructions provided by the manufacturer. The total protein concentration

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.