TAILIEUCHUNG - Protein Purification Part 7

Tham khảo tài liệu 'protein purification part 7', khoa học tự nhiên, công nghệ sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Episomal Vectors for Rapid Expression and Purification of Proteins in Mammalian Cells 83 hll-6 Fig. 7. Neutralization of the biological activity of commercially available hIL-17F closed circles and purified hIL-17F open circles using an anti-hIL-17F monoclonal antibody left . Schematic representation of the cell-based assay right . Heterodimeric proteins Recombinant human CD79A B As an example demonstrating successful heterodimeric protein complex expression the sequences encoding the extracellular domains of human CD79A and CD79B were cloned into a dual promoter tricistronic vector Figure 1 . The native CD79A B heterodimer is expressed on B lymphocytes and is the signalling component of the B cell receptor complex Chu et al. 2001 . For recombinant expression the two proteins were fused to different tags. A hexahistidine tag was introduced at the C-terminus of CD79B for purification by IMAC and an AviTag at the C-terminus of CD79A for in vivo biotinylation. During the purification step CD79A B heterodimer and CD79B homodimer complexes were purified via the hexahistidine tag on CD79B. The purified protein complexes analyzed by SDS-PAGE presented a diffuse pattern due to glycosylation of the proteins Figure 8 . As only CD79A is biotinylated only the heterodimeric complex can be specifically immobilized on streptavidin coated surfaces. 84 Protein Purification Fig. 8. Purification of human CD79A B heterodimer. Chromatogram of the gradient elution step left . The indicated fractions were collected in several pools desalted and analyzed by SdS-PaGe right . Fig. 9. Schematic representation of the ELISA used for the detection of CD79A B heterodimer in the pooled elution fractions top . ELISA signals obtained using anti-CD79A bottom left and anti-hCD79B bottom right antibodies and dilutions of the pooled fractions pools 2 to 5 . Biotinylated hCD79A and hCD79B homodimers were used as positive and negative controls. Episomal Vectors for Rapid Expression and Purification .

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TỪ KHÓA LIÊN QUAN
TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.