TAILIEUCHUNG - Định enotyp và phát hiện đột biến YMDD kháng lamivudine của HBV bằng kỹ thuật giải trình tự vùng gene rt của HBV

Đặt vấn đề: Thất bại trong điều trị nhiễm HBV bằng lamivudine là do virus có đột biến gần và/hay ngay tại YMDD chính là vị trí tác động thuốc trên gene polymerase của HBV. Có 4 đột biến giúp HBV kháng lamuvidine đã được chứng minh; đó là rtV173L, rtL180M, rtM204I/V, và rtV207I. Mục tiêu nghiên cứu: Xây dựng kỹ thuật giải trình tự để định genotype HBV và phát hiện đột biến YMDD kháng lamivudine của HBV. | ) được thiết kế bằng phần mềm Primer premier đặc hiệu đọan DNA nêu trên. Mồi được cho vào PCR mix với hàm lượng 15pm cho một PCR mix. Thực hiện PCR theo chu kỳ nhiệt như sau: 1 chu kỳ 95oC trong 5 phút; sau đó là 40 chu kỳ 94oC trong 30 giây, 55oC trong 30 giây và 72oC trong 1 phút; và cuối cùng là 1 chu kỳ 72oC trong 7 phút. Sau khi hòan tất PCR, phát hiện sản phẩm khuếch đại bằng điện di trong thạch . Sau khi điện di và xác định có sản phẩm khuếch đại đặc hiệu dài 567bp, sản phẩm PCR được tinh sạch bằng với bộ thử nghiệm tinh sạch sản phẩm PCR (PCR clean-up kit) do Promega sản xuất (Cat. #A9281). Sản phẩm PCR sau khi tinh sạch được định lượng nồng độ DNA bằng máy Genquant của Pharmacia. Sau đó, thực hiện phản ứng giải trình tự sản phẩm PCR đã tinh sạch và xác định nồng độ ở trên với PCR sequencing mix của Becman (DTCS: Dye Terminator Cycle Sequencing) với primer 827R. Sản phẩm giải trình tự được làm tủa và tinh sạch bằng phương pháp tủa với ethanol. Cuối cùng thực hiện giải trình tự trên máy sequencer CEQ8000 của Becman Coulter. Kết quả giải trình tự được phân tích trên chức năng analysis của CEQ8000 có chọn thêm thông số heterozygote. Sau đó dùng chức năng investigator của CEQ8000 để thực hiện đối chiếu so sánh trình tự giải được với trình tự tham chiếu được thành lập từ trình tự của gene polymerase

• Y học thường thức
• PCR
• phát hiện đột biến
• kỹ thuật giải trình tự vùng gene rt của HBV
• kỹ thuật PCR
• nhân bản ADN
• giáo trình PCR
• phương pháp PCR
• tài liệu PCR
• tìm hiểu PCR
• bài giảng PCR
• Thiết kế mồi và thực hiện PCR
• Độ nhạy của bộ kit triplex PCR
• Bộ kit multiplex PCR chẩn đoán phân biệt loài
• Hiệu quả bộ kit triplex PCR
• Đánh giá độ nhạy và độ đặc hiệu của kit
• Bộ kit triplex PCR phân biệt ba loài sắn dây
• Kinh nghiệm xây dựng PCR/realtime PCR
• Phát triển PCR/realtime PCR
• Kỹ thuật sinh học phân tử
• Tác nhân vi sinh
• Phương tiện vi sinh
• Áp dụng PCR
• Real time PCR
• Real time PCR phòng thí nghiệm chẩn đoán
• Phòng thí nghiệm chẩn đoán
• PCR phòng thí nghiệm chẩn đoán
• Vấn đề cơ bản Real time PCR
• Thiết bị real time dùng đèn
• Máy real time PCR
• Thuốc thử cho real time PCR
• Real time PCR sử dụng probe
• Thuyết trình nhóm
• Quy trình phản ứng PCR
• Ứng dụng PCR
• Thực nghiệm PCR
• Nguyên tắc PCR
• nguyên tắc của PCR
• phản ứng PCR
• ảnh hưởng của PCR
• tài liệu sinh học
• tài liệu về PCR
• nguyên lý PCR
• Multi drug resistance
• SHVand PCR
• PCR amplification of SHV gene
• PCR amplification
• Freshwater fish (Cirrhinus cirrhosis)
• Bacillus cereus
• Enterotoxigenic bacillus cereus species isolated
• Conventional PCR
• Multiplex PCR
• Amplified PCR product
• Quy trình multiplex PCR
• Tính chuyên biệt các cặp mồi trong phản ứng multiplex PCR
• Nồng độ primer cho phản ứng multiplex PCR phát hiện DNA
• Phương pháp phát hiện thịt heo trong thực phẩm
• Phương pháp phát hiện thịt bò
• Kỹ thuật multiplex PCR
• Riemerella anatipestifer
• REP PCR
• Electrophoretic patterns
• Riemerella anatipestifer isolates
• Repetitive sequence PCR
• BMC Bioinformatics
• PCR target prediction software
• Amplicon prediction
• Degenerate PCR
• Consensus PCR
• sản phẩm PCR
• xác định kiểu gen của HCV
• thử nghiệm RT real time PCR
• đặc hiệu vùng 5’ NC
• phương pháp nghiên cứu
• tiểu luận nghiên cứu đề tài
• cách trình bày báo cáo
• điều kiện phản ứng PCR
• dung dịch đệm cho phản ứng PCR
• quy trình phản ứng
• hạn chế của phương pháp
• Virut gây bệnh dịch tả vịt
• Đàn vịt sinh sản
• Kỹ thuật RT PCR
• Virut dịch tả vịt
• Virut DTV gây bệnh dịch tả vịt
• Realtime PCR
• ứng dụng Realtime PCR
• tài liệu Realtime PCR
• bệnh học đại cương
• giải phẩu học
• phác đồ điều trị
• y cơ sở
• ngoại cơ sở
• Bài giảng PCR Nguyên tắc và ứng dụng
• Cách chống ngoại nhiễm
• Nguyên tắc phản ứng
• Nghiên cứu ADN
• Kỹ thuật chẩn đoán
• PCR chẩn đoán
• PCR Real time
• Phòng thí nghiệm nghiên cứu
• Bước đầu xây dựng quy trình PCR
• Xây dựng quy trình PCR
• Quy trình PCR
• Thực phẩm chay
• Vùng 16s rDNA ty thể
• Phát hiện RSV ở bệnh nhi dưới 5 tuổi
• Phát hiện RSV
• Kỹ thuật realtime RT PCR
• Kỹ thuật RT PCR truyền thống
• Hô hấp do RSV
• Tạo chí y học
• Nghiên cứu y học
• Kỹ thuật real time PCR
• Kỹ thuật nested PCR
• Chẩn đoán loài plasmodium spp
• Phát triển kỹ thuật multiplex PCR
• Gen chlamydia trachomatis
• Giải mã trình tự gen
• Tạp chí khoa học
• Tạp chí y dược
• Y dược quân sự
• Phòng chống não mô cầu
• Neisseria meningitidis
• Nhóm huyết thanh
• Tinh sạch ADN của N
• meningitidis
• Gen CtrA mã hóa