TAILIEUCHUNG - Bài giảng môn Sinh học phân tử: Chương 8 - Nguyễn Hữu Trí

Bài giảng Sinh học phân tử: Chương 8 Các kỹ thuật phân tích trong Sinh học phân tử, cung cấp cho người học những kiến thức như: Tách chiết DNA; Phương pháp sắc ký; Các phương pháp định tính và định lượng thô nucleic acid; Điện di trên gel; Điện di trên gel agarose; Điện di trên gel polyacrylamide; Phương pháp định lượng bằng quang phổ kế; .Mời các bạn cùng tham khảo! | Chương 8 Các kỹ thuật phân tích trong Sinh học phân tử 5 18 2020 4 17 PM 1 Nguyễn Hữu Trí nhtri@ Tách chiết DNA Để thu nhận DNA tinh sạch cần loại bỏ những thành phần tạp nhiễm mà quan trọng nhất là protein. Sự tách chiết DNA dựa trên nguyên tắc hòa tan khác nhau của các phân tử khác nhau nucleic acid protein trong hai pha không hòa tan phenol chloroform nước . Mục đích là thu được các phân tử nucleic acid ở trạng thái nguyên vẹn tối đa không bị phân hủy bởi các tác nhân cơ học hay hóa học. Các nucleic acid cần được tách chiết trong điều kiện nhiệt độ thấp để ức chế hoạt động của các enzyme nội bào DNase và RNase . Sau công đoạn tách chiết nucleic acid tinh sạch nằm trong một thể tích dung dịch lớn. Sự tủa kết hợp với ly tâm cho phép thu nhận nucleic acid dưới dạng cặn tủa dễ bảo quản và khi cần có thể hòa lại trong nước theo nồng độ mong muốn. 2 Nguyễn Hữu Trí 5 18 2020 4 17 PM nhtri@ 1 Tách chiết DNA Bước 1 phá màng tế bào màng nhân Bước 2 loại protein Bước 3 thu hồi nucleic acid 3 Nguyễn Hữu Trí 5 18 2020 4 17 PM nhtri@ Tách chiết DNA Phá màng tế bào màng nhân nghiền tế bào mô trong một hỗn hợp chất tẩy SDS và proteinase để phá vỡ màng tế bào màng nhân giải phóng DNA ra môi trường đồng thời phân hủy các protein liên kết với DNA. Chất tẩy là phân tử lưỡng cực sẽ kết hợp với protein màng và các phân tử phospholipid làm phá vỡ cấu trúc màng. Chất tẩy ion hóa có tác dụng phá màng mạnh chất tẩy không ion hóa có tác dụng phá màng nhẹ hơn. Loại protein lắc mẫu trong dung dịch phenol chloroform để biến tính protein đồng thời không hòa tan nucleic acid. Protein bị biến tính không hòa tan trong pha nước có chứa nucleic acid và sau khi li tâm sẽ tủa thành một lớp nằm giữa pha nước và pha phenol chloroform. Thu hồi nucleic acid trong pha nước. Tủa nucleic acid nhằm thu nhận nucleic acid dưới dạng cô đặc để bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme và khi cần có thể hòa lại trong nước theo nồng độ mong muốn. Có thể tủa trong ethanol

• Sinh học
• Bài giảng Sinh học phân tử
• Sinh học phân tử
• Phương pháp lai phân tử
• Kỹ thuật phân tích
• Kiểu lai phân tử
• Phương pháp giải trình tự
• Bài giảng Sinh học ph ân tử
• Chủng vi sinh vật
• Phương pháp sinh học phân tử
• Kỹ thuật sinh học phân tử
• Ứng dựng sinh học phân tử
• Lược sử phát triển sinh học phân tử
• Nhập môn sinh học phân tử
• Phương pháp Lược sử phát triển sinh học phân tử
• Giáo trình sinh học phân tử
• Tài liệu sinh học phân tử
• Công nghệ sinh học phân tử
• Ứng dụng sinh học phân tử
• Phân loại sinh học phân tử
• lý thuyết sinh học phân tử
• quả trình sinh học phân tử
• Sinh học phân tử hiện đại
• Giai đoạn sinh học phân tử
• Khái niệm sinh học phân tử
• Vai trò sinh học phân tử
• Enzym dùng trong sinh học phân tử
• Thiết bị sinh học phân tử
• Dụng cụ sinh học phân tử
• Biểu hiện Gene
• Bài giảng Sinh học 6 bài 8
• Bài giảng điện tử Sinh học 6
• Bài giảng điện tử lớp 6
• Bài giảng lớp 6 Sinh học
• Quá trình phân bào
• Tế bào ở mô phân sinh
• Sự phân bào
• Bài giảng Sinh học 10 bài 19
• Bài giảng điện tử Sinh học 10
• Bài giảng điện tử lớp 10
• Bài giảng lớp 10 Sinh học
• Sinh học 10 bài giảm phân
• Bài giảng về giảm phân
• Quá trình giảm phân
• Lược sử ra đời sinh học phân tử
• Học thuyết tiến hóa
• Ứng dụng của sinh học phân tử
• Gen sinh trưởng
• Sinh học tế bào
• Đại phân tử sinh học
• Deoxyribonucleic acid
• Ribonucleic acid
• Nucleic acid
• đề cương sinh học phân tử