TAILIEUCHUNG - Dimer hóa protein dung hợp với RHAU bởi G-quadruplex có cấu trúc song song

Bài viết tiến hành nghiên cứu khả năng dimer hóa protein liên kết với peptide RHAU có kích thước lớn hơn (53 amino acid) của cấu trúc G-quadruplex T95-2T nhằm đa dạng hóa các lựa chọn phục vụ cho các nghiên cứu trên tế bào trong tương lai. | TẠP CHÍ KHOA HỌC HO CHI MINH CITY UNIVERSITY OF EDUCATION TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH JOURNAL OF SCIENCE Tập 18 Số 3 2021 548-558 Vol. 18 No. 3 2021 548-558 ISSN 1859-3100 Website http Bài báo nghiên cứu DIMER HÓA PROTEIN DUNG HỢP VỚI RHAU BỞI G-QUADRUPLEX CÓ CẤU TRÚC SONG SONG Trương Thị Tinh Tươm1 Nguyễn Đắc Nguyên Phúc2 Phan Hùng Việt3 Đặng Thanh Dũng3 Phan Thị Phượng Trang1 Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh Việt Nam 1 2 Cranbrook Schools USA 3 Trường Đại học Mở thành phố Hồ Chí Minh Việt Nam Tác giả liên hệ Phan Thị Phượng Trang Email ptptrang@ Ngày nhận bài 18-3-2021 ngày nhận bài sửa 25-3-2021 ngày chấp nhận đăng 30-3-2021 TÓM TẮT Protein dimer có vai trò quan trọng trong hoạt động sống của tế bào như hoạt hóa enzyme truyền tín hiệu qua các thụ thể và điều hòa biểu hiện gen. Các phương pháp dimer hóa protein bởi các phân tử trung gian ra đời nhằm giúp con người chủ động trong việc điều hòa các quá trình sinh học. G-quadruplex là một phân tử có tiềm năng dimer hóa protein thông qua liên kết đặc hiệu với 2 phân tử RHAU RNA helicase liên kết với vùng trình tự giàu adenine và uracil . Tuy nhiên đến nay chức năng này của G-quadruplex vẫn chưa được nghiên cứu rộng rãi. Trong nghiên cứu dưới đây chúng tôi đã dòng hóa vector pTD14 mang gen mã hóa YFP dung hợp với peptide RHAU và biểu hiện tinh chế protein RHAU-YFP. Sự dimer hóa hai protein RHAU-YFP và RHAU-CFP thông qua G-quadruplex được kiểm tra bằng phản ứng FRET. Kết quả cho thấy vector pTD14 đã được dòng hóa thành công có thể được biểu hiện tạo protein RHAU-YFP trong điều kiện nhiệt độ 16OC nồng độ IPTG 0 05 mM trong 24 giờ. Protein RHAU-YFP được tinh chế một lần qua cột His-Trap. Phản ứng FRET cho thấy G-quadruplex có khả năng dimer hóa protein RHAU-YFP và RHAU-CFP trong điều kiện thí nghiệm và nồng độ G-quadruplex 500 µM cho khả năng dimer hóa cao nhất. Các kết quả trên là tiền đề cho việc ứng dụng G-quadruplex để điều hòa các quá

• Sinh học
• Dimer hóa protein
• G quadruplex có cấu trúc song song
• Khả năng dimer hóa protein liên kết
• Hoạt hóa enzyme
• Vector pTD14 mang gen mã hóa YFP
• Tương tác protein protein
• Cảm ứng sự dimer hóa protein
• Cấu trúc G quadruplex
• Kĩ thuật FRET
• Tính hiệu FRET