TAILIEUCHUNG - Các kỹ thuật trong Sinh học phổ thông

Tham khảo tài liệu 'các kỹ thuật trong sinh học phổ thông', tài liệu phổ thông, sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả | Các phương pháp tách chiết nucleic acid Các phương pháp định tính và định lượng cơ bản 1. Các phương pháp tách chiết nucleic acid V Phương pháp tách chiết DNA V Phương pháp tách chiết RNA toàn phần và mRNA V Ly tâm V Phương pháp sắc ký 2. Các phương pháp định tính và định lượng thô nucleic acid V Phương pháp đo bằng quang phổ kế V Phương pháp điện di Tách chiết DNA Đêjhu nhận DNA tinh sạch cần loại bỏ những thành phần tạp nhiễm mà quan trọng nhất là protein. Sự tách chiết DNA dựa trên nguyên tắc hòa tan khác nhau của các phân tử khác nhau nucleic acid protein trong hai pha không hòa tan phenol chloroform nước . Mục đích là thu được các phân tử nucleic acid ở trạng thái nguyên vẹn tối đa không bị phân hủy bởi các tác nhân cơ học hay hóa học. Các nucleic acid cần được tách chiết trong điều kiện nhiệt độ thấp đê ức chế hoạt động của các enzyme nội bào DNase và RNase . Sau công đoạn tách chiết nucleic acid tinh sạch nằm trong một thê tích dung dịch lớn. Sự tủa kết hợp với ly tâm cho phép thu nhận nucleic acid dưới dạng cặn tủa dễ bảo quản và khi cần có thê hòa lại trong nước theo nồng độ mong muốn. Tách chiết DNA Bước 1 phá màng tế bào màng nhân Bước 2 loại protein Bước 3 thu hồi nucleic acid Ly tâm phân đoạn a và phân đoạn vung b phân tách các trình tự trong hỗn hợp dựa trên khối lượng của chúng. Thời gian và lực ly tâm được xác định cho từng nhóm phần tử. Dung dịch ly tâm có tỷ trọng thấp hơn các phần tử cần phân tách. Phá màng tế bào màng nhân nghiền tế bào mô trong một hỗn hợp chất tây SDS và proteinase đe phá vỡ màng tế bào màng nhân giải phóng DNA ra môi trường đồng thời phân hủy các protein liên kết với DNA. - Chất tẩy là phân tử lưỡng cực sẽ kết hợp với protein màng và các phân tử phospholipid làm phávỡ cấu trúc màng. - Chất tẩy ion hóa có tác dụng phá màng mạnh chất tẩy không ion hóa có tác dụng phá màng nhẹ hơn. Loại protein lắc mẫu trong dung dịch phenol chloroform đê biến tính protein đồng thời không hòa tan nucleic acid. Protein bị biến tính không hòa tan

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.