TAILIEUCHUNG - Nhân nhanh hoa hoàng lan bằng kỹ thuật nuôi cấy phôi soma
Bài viết trình bày nuôi cấy tạo thể phôi PLB; nuôi cấy tạo dịch huyền phù mô sẹo phôi hóa; nuôi cấy tăng sinh tế bào mô sẹo phôi hóa; ảnh hưởng của mô nuôi cấy đến tái sinh mô sẹo phôi hóa. | Nhõn nhanh hoa hoàng lan bằng kỹ thuật nuụi cấy phụi soma 33(4): 72-78 Tạp chí Sinh học 12-2011 NHÂN NHANH HOA Hoàng LAN BằNG Kỹ THUậT NUÔI CấY PHÔI SOMA Bùi Thị Tường Thu, Trần Văn Minh Viện Sinh học nhiệt đới Vi nhân giống truyền thống trên loài hoa lan Môi trường dinh d−ỡng khoáng cơ bản được hiện nay dẫn đến một vấn đề mà các phòng thí sử dụng trong nuôi cấy là MS (Murashige &. nghiệm vi nhân giống thường gặp phải đó là tốn Skoog, 1962) [6]. Có bổ sung: BA (6- nhiều chi phí lao động để sản xuất cây con với benzylaminopurine), TDZ (thidiazuron), kinetin khối lượng lớn, khi đ−a ra thị trường giá thành (6-furfurylaminopurine), IAA (β-indolacetic cây con lại cao [7]. Hệ thống nhân giống bằng acid), IBA (β-indolacetic acid), NAA (α- phôi vô tính [2] sẽ giải quyết được rào cản nêu napthalene acetic acid), B1 (5 mg/l), nước dừa, trên với các lợi thế: nhân nhanh dưới dạng tế đường sucrose (30 g/l). bào, phôi vô tính là một thể biệt hóa có hệ số tái Điều kiện nuôi cấy: nhiệt độ phòng 26 ± sinh cao, tốn ít chi phí lao động và giá thành hạ 2oC, RH = 65%, thời gian chiếu sáng 10 [4]. Vật liệu khởi đầu là thể phôi giả (PLB) và bẹ lá non in vitro trong nuôi cấy phôi vô tính có giờ/ngày, cường độ chiếu sáng 33,3 àmol/m2/s, vai trò đảm bảo được đặc điểm di truyền bố mẹ tốc độ lắc 100 rpm. và duy trì hệ số tái sinh cao trong thời gian dài Thiết kế thí nghiệm: bố trí theo khối đầy đủ [9]. Môi trường nuôi cấy phôi vô tính thích hợp ngẫu nhiên, 3 lần lập lại, mỗi lần lập lại nuôi chiếm vai trò quan trọng trong quá trình sinh cấy 3 bình tam giác (chứa 60 ml môi trường bán tr−ởng và biệt hóa tế bào phôi [1]. Điều khiển rắn hay 50 ml môi trường lỏng). Số liệu được quá trình biệt hóa và tái sinh phôi vô tính dưới phân tích bằng phầm mềm MSTATC (t = 0,05). tác động của các chất điều hòa sinh tr−ởng BA, kinetin, TDZ, NAA đV trở thành quy luật [3]. II. KếT QUả Và THảO LUậN PLB là một thể đa phôi phôi đặc biệt phát sinh trong nuôi cấy
đang nạp các trang xem trước