TAILIEUCHUNG - Chế tạo cộng hợp Ochratoxin-albumin huyết thanh bò bằng phương pháp Ester hoạt hóa trong môi trường Micelle

Lựa chọn phương pháp thích hợp để tạo cộng hợp, xác định mật độ gắn OTA lên albumin huyết thanh bò (Bovine Serum Albumin, BSA) và đánh giá đáp ứng kháng thể tạo thành của cộng hợp OTA-BSA tự tạo so với OTA-BSA thương mại. | Chế tạo cộng hợp Ochratoxin-albumin huyết thanh bò bằng phương pháp Ester hoạt hóa trong môi trường Micelle Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 23 * Số 3 * 2019 Nghiên cứu Y học CHẾ TẠO CỘNG HỢP OCHRATOXIN-ALBUMIN HUYẾT THANH BÒ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ESTER HOẠT HÓA TRONG MÔI TRƯỜNG MICELLE Dương Ngọc Diễm*, Đỗ Thị Kim Yến*, Nguyễn Thị Nguyệt Thu* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Ochratoxin A (OTA) là hapten nên không có tính sinh miễn dịch. Do đó, cần gắn OTA với 1 chất có tính sinh miễn dịch để kích thích tạo kháng thể đặc hiệu. Việc lựa chọn phương pháp cộng hợp và xác định hiệu suất cộng hợp đóng vai trò đặc biệt quan trọng để chế tạo được cộng hợp tốt nhất và dự đoán sớm kết quả gây miễn dịch. Mục tiêu: Lựa chọn phương pháp thích hợp để tạo cộng hợp, xác định mật độ gắn OTA lên albumin huyết thanh bò (Bovine Serum Albumin, BSA) và đánh giá đáp ứng kháng thể tạo thành của cộng hợp OTA-BSA tự tạo so với OTA-BSA thương mại. Phương pháp nghiên cứu: Thiết kế thực nghiệm, OTA được cộng hợp vào BSA bằng phương pháp ester hoạt hóa trong môi trường micelle. Xác định hiệu suất cộng hợp OTA lên BSA trực tiếp bằng phương pháp hấp phụ quang, so sánh với phương pháp gián tiếp sử dụng 2,4,6-trinitrobenzensulfonic acid (TNBS). So sánh OTA- BSA tự tạo với OTA-BSA thương mại (3OTA/BSA theo công bố của nhà sản xuất) bằng cách gây miễn dịch trên thỏ và đánh giá khả năng đáp ứng bằng cột sắc kí ái lực miễn dịch (immuno affinity chromatography, IAC). Kết quả: OTA cộng hợp lên BSA với mật độ gắn của cộng hợp OTA-BSA được xác định bằng phương pháp hấp phụ quang là 5OTA/BSA. Phương pháp TNBS không xác định được mật độ gắn OTA lên BSA do nhiễu phổ của OTA. Dung lượng cột IAC tương ứng OTA-BSA tự tạo và thương mại lần lượt là 150 ng và 50 ng. Kết luận: Phương pháp hấp phụ quang là đơn giản và thích hợp để xác định hiệu suất cộng hợp OTA lên BSA. Phương pháp cộng hợp trong môi trường micelle tạo được cộng hợp OTA-BSA với tỉ lệ gắn 5OTA/BSA và hiệu giá kháng thể cao .

• Nông nghiệp
• Cộng hợp OTA BSA
• Ester hoạt hóa
• Huyết thanh bò
• Môi trường Micelle
• OTA BSA thương mại