TAILIEUCHUNG - Phát triển kỹ thuật reverse transcription polymerase chain reaction xác định virut Ebola

Mục tiêu nghiên cứu của bài viết nhằm thiết kế phản ứng RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) phát hiện đồng thời 5 loài virut Ebola, góp phần chẩn đoán nhanh, chính xác, kịp thời ngăn chặn và kiểm soát lây lan của dịch bệnh do virut Ebola. | T¹p chÝ y - d−îc häc qu©n sù sè 8-2016 PHÁT TRIỂN KỸ THUẬT REVERSE TRANSCRIPTION POLYMERASE CHAIN REACTION XÁC ĐỊNH VIRUT EBOLA Nguyễn Văn An*; Nguyễn Thái Sơn*; Bùi Tiến Sỹ** Hoàng Xuân Sử***; Hồ Hữu Thọ***; Đinh Thị Thu Hằng*** TÓM TẮT Mục tiêu: thiết kế phản ứng RT-PCR (Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) phát hiện đồng thời 5 loài virut Ebola, góp phần chẩn đoán nhanh, chính xác, kịp thời ngăn chặn và kiểm soát lây lan của dịch bệnh do virut Ebola. Vật liệu và phương pháp: các trình tự toàn bộ bộ gen của 5 loài virut Ebola được thu thập từ Ngân hàng dữ liệu GenBank. Sử dụng phần mềm tin sinh học thiết kế mồi đặc hiệu với virut Ebola, thực hiện phản ứng RT-PCR với các cặp mồi vừa thiết kế trên mẫu ARN chuẩn dương và chuẩn âm bằng bộ kít One-Step RT-PCR (Thermo Fisher, Mỹ). Kết quả: thiết kế được 01 mồi xuôi (Ebo-pan-Fwd: GTGTGCGARTAACTAYGAGGAAG), 02 mồi ngược (Ebo-pan-Rev2: GGATGACTCTTTGYCGMACAAT, Ebo-pan-Rev3: GGCATGGCAGCMARTGTTCTC). Kết quả thực hiện phản ứng RT-PCR sử dụng bộ kít One-Step RT-PCR (Thermo Fisher, Mỹ) đối với chuẩn dương ARN của virut Ebola chủng Zaire Mayinga (giáo sư Jonas SchmidtChanasit ở Viện Y học Nhiệt đới Bernhard Nocht, Hamburg, Cộng hòa Liên bang Đức cung cấp) cho 2 băng đặc hiệu với Ebola có kích thước lần lượt là 541 bp, 830 bp; không xuất hiện băng đặc hiệu đối với mẫu chuẩn âm là virut Dengue. Kết luận: đã thiết kế thành công phản ứng RT-PCR chẩn đoán virut Ebola. * Từ khóa: Virut Ebola; RT-PCR; Zaire Ebola. Development and Validation of One-Step Reverse-TranscriptionPCR for Simultanous Detection of Five Ebolavirus Species Summary Objectives: To establish one-step RT-PCR for simultanous detection of five Ebolavirus species. Materials and methods: Full genome sequences of five Ebolavirus species retrieved from the Genebank for design of primers using Primer Express software. RT-PCR has been optimized and validated with the positive and negative standards using One-Step RT-PCR kit (Thermo Fisher, USA). Results and .

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.