TAILIEUCHUNG - PCR NHỮNG VẤN ĐỀ CƠ BẢN

Kỹ thuật chống ngoại nhiễm sản phẩm khuếch đại Nguyên tắc PCR mix có thêm dUTP và men UNG (Uracil DNA glycosidase) Sản phẩm khuếch đại có T bị thay thế bởi U Sản phẩn khuếch đại nếu ngoại nhiễm vào PCR mix sẽ bị men UNG phá hủy trước khi thực hiện PCR | PCR NHỮNG VẤN ĐỀ CƠ BẢN `,lppppp NỘI DUNG Nguyên tắc PCR Phản ứng PCR Các loại PCR Real-time PCR Ứng dụng của PCR PCR chẩn đoán tác nhân vi sinh vật NGUYÊN TẮC CỦA PCR Thử nghiệm nhân bản một đoạn DNA trong ống nghiệm dựa vào các chu kỳ nhiệt 1 2 3 4 n 2n NGUYÊN TẮC CỦA PCR Chu kỳ nhiệt 3 giai đoạn : Biến tính Bắt cặp Kéo dài DNA đích 1 Biến tính (94oC ) 2 Bắt cặp (55-65o C) 3 Kéo dài (72o C) 5’ 3’ 3’ 5’ Mồi Taq polymerase dNTP PCR buffer + MgCl2 PCR MIX DNA đích (Template) PHẢN ỨNG PCR PCR mix 30X-40X 94oC/15s-1min 55-65oC/15s-1min 72oC/30s-3min PHẢN ỨNG PCR Máy luân nhiệt Tạo chu kỳ nhiệt Buồng ủ nhiệt Nhiệt độ lên xuống chính xác, đồng nhất Tốc độ tăng giảm nhiệt độ cực nhanh theo chu kỳ PHẢN ỨNG PCR Men polymerase chịu nhiệt Tách chiết từ VK Thermus aquaticus (Taq polymerase) Tái tổ hợp từ VK E. coli / VK không chịu nhiệt PHẢN ỨNG PCR Kỹ thuật chống ngoại nhiễm sản phẩm khuếch đại Nguyên tắc PCR mix có thêm dUTP và men UNG (Uracil DNA glycosidase) Sản phẩm khuếch đại có T bị thay thế bởi U Sản phẩn khuếch đại nếu ngoại nhiễm vào PCR mix sẽ bị men UNG phá hủy trước khi thực hiện PCR CÁC LOẠI PCR Monoplex PCR PCR 940C for 30” 550C for 30” 720C for 01’ 40X CÁC LOẠI PCR Multiplex PCR PCR 940C for 30” 550C for 30” 720C for 01’ 40X CÁC LOẠI PCR Touch down PCR PCR 940C for 30” 550C for 30” 720C for 01’ 40X 940C for 30” 650C for 30” 05X 940C for 30” 600C for 30” 05X CÁC LOẠI PCR PCR 94oC for 30” 55oC for 30” 72oC for 01’ 40X PCR 94oC for 30” 55oC for 30” 72oC for 01’ 40X Nested PCR CÁC LOẠI PCR Nonstop nested PCR PCR 94oC for 30” 65oC for 30” 72oC for 01’ 10X PCR 94oC for 30” 55oC for 30” 72oC for 01’ 40X CÁC LOẠI PCR RT- PCR (one-step) PCR PCR RNA RT (reverse transcription) RNA RT (reverse transcription) CÁC LOẠI PCR RT- PCR (two-step) PCR PCR RNA RT (reverse transcription) RT with specific primers RNA RT (reverse transcription) RT with random primers Real-time PCR Nguyên tắc Real-time PCR Biểu đồ khuếch đại Real-time PCR Biểu đồ chuẩn Laser or UV Camera .

• Y học thường thức
• PCR NHỮNG VẤN ĐỀ CƠ BẢN
• bài giảng siêu âm
• chẩn đoán hình ảnh
• siêu âm
• tổng quan siêu âm
• bài giảng chẩn đoán hình ảnh
• Chẩn đoán hình ảnh hệ xương khớp
• Tài liệu chẩn đoán hình ảnh
• Kỹ thuật chẩn đoán hình ảnh
• Kỹ thuật hình ảnh
• Hình ảnh cắt lớp
• Hình ảnh thần kinh
• Hình ảnh sọ não
• Tìm hiểu chẩn đoán hình ảnh
• Tổng quan chẩn đoán hình ảnh
• Ngành Chẩn đoán hình ảnh
• Tham khảo Chẩn đoán hình ảnh
• Chẩn đoán hình ảnh hệ tiêu hóa
• Hình ảnh hệ tiêu hóa
• Chẩn đoán hình ảnh hệ tim mạch
• Chẩn đoán Xquang
• Chẩn đoán hình ảnh hệ tiêu hoá
• Chẩn đoán hình ảnh bộ máy tiết niệu
• Chẩn đoán X quang xương khớp
• Điện quang thần kinh
• Kỹ thuật hình ảnh khám hệ tiết niệu
• Hội chứng tắc đường dẫn niệu
• Chẩn đoán hình ảnh gan
• Kỹ thuật chẩn đoán hệ thần kinh
• Siêu âm trong chẩn đoán vàng da
• bài giảng Siêu âm trong chẩn đoán vàng da
• tài liệu Siêu âm trong chẩn đoán vàng da
• Siêu âm chẩn đoán buồng trứng
• Chẩn đoán buồng trứng
• Siêu âm buồng trứng
• Chẩn đoán hình ảnh y học
• hương dẫn Chẩn doán hình ảnh
• kinh nghiệm Chẩn doán hình ảnh
• giáo trình Chẩn doán hình ảnh
• bài giảng Chẩn doán hình ảnh
• kỹ thuật Chẩn doán hình ảnh
• Chẩn doán hình ảnh
• Chẩn đoán hình ảnh lao phổi
• Hình ảnh học
• Lao sơ nhiễm trẻ em
• Lao sơ nhiễm người lớn
• Hệ tim mạch
• Bệnh tim mạch
• Giải phẫu X quang tim
• hội chứng mạch máu
• giáo trình CHẨN ĐOÁN HÌNH ẢNH
• Cắt lớp vi tính
• Cộng hưởng từ
• Kỹ thuật hình ảnh khám hệ hô hấp
• Kỹ thuật chẩn đoán xương khớp
• Chẩn đoán siêu âm đường mật
• siêu âm đường mật
• thực tập y sinh
• Siêu âm tụy
• CHẨN ĐOÁN HÌNH ẢNH THỦNG TẠNG RỖNG
• Hình ảnh giải phẩu CT
• Khảo sát hình ảnh giá trị
• Chẩn đoán hình ảnh trung thất
• Chẩn đoán hình ảnh phổi
• Kỹ thuật CT
• Siêu âm trong chẩn đoán bệnh đường mật
• Kỹ thuật siêu âm
• Chẩn đoán qua ngã bụng
• Siêu âm trong mổ
• Siêu âm chẩn đoán phần phụ
• Siêu âm chẩn đoán
• Siêu âm sản phụ khoa