Đang chuẩn bị liên kết để tải về tài liệu:
Báo cáo khoa học: Investigation of the substrate specificity of a b-glycosidase from Spodoptera frugiperda using site-directed mutagenesis and bioenergetics analysis

Đang chuẩn bị nút TẢI XUỐNG, xin hãy chờ

The specificity of the Spodoptera frugiperda digestive b-glycosidase (Sfbgly50) for fucosides, glucosides and galactosides is determined by noncovalent interactions of glycone6-OHandglycone 4-OHwith the active-site residues Q39andE451.Site-directedmutagenesisandenzymesteady-state kinetics were described, showing that replacement of E451 with glutamine increased the preference of Sfbgly50 for glucosides in comparison to galactosides, whereas replacing E451 with serine had the opposite effect. | Eur. J. Biochem. 271 4169-4177 2004 FEBS 2004 doi 10.1111 j.1432-1033.2004.04354.x Investigation of the substrate specificity of a b-glycosidase from Spodoptera frugiperda using site-directed mutagenesis and bioenergetics analysis Sandro R. Marana Eduardo H. P. Andrade Clelia Ferreira and Walter R. Terra Departamento de Bioquimica Instituto de Quimica Universidade de Scio Paulo Scio Paulo Brazil The specificity of the Spodoptera frugiperda digestive b-glycosidase Sfbgly50 for fucosides glucosides and galactosides is determined by noncovalent interactions of glycone 6-OH and glycone 4-OH with the active-site residues Q39 and E451. Site-directed mutagenesis and enzyme steadystate kinetics were described showing that replacement of E451 with glutamine increased the preference of Sfbgly50 for glucosides in comparison to galactosides whereas replacing E451 with serine had the opposite effect. In contrast the replacement of E451 with aspartate did not change Sfbgly50 specificity. The energy of the interactions formed by these different residues with the axial and equatorial glycone 4-OH were also measured showing that the increase in preference for galactosides resulted from a larger energy decrease in the interaction with equatorial 4-OH than with axial 4-OH 22.6 vs. 13.9 kJ-mol-1 whereas the increase in preference for glucosides was caused by an energy reduction in the interaction with the axial 4-OH 5.1 kJ-mol-1 . The introduction of glutamine at position 451 or of asparagine at position 39 increased the preference of Sfbgly50 for fucosides in comparison to galactosides whereas the presence of aspartate or serine at position 451 had less effect on this preference. The hydrolysis of fucosides was favored because glutamine at position 451 increased a steric hindrance with 6-OH of 7.1 kJ-mol-1 and asparagine at position 39 disrupted a favorable interaction with this same hydroxyl. In conclusion it is proposed that the specificity of new b-glycosidase mutants can be .

TAILIEUCHUNG - Chia sẻ tài liệu không giới hạn
Địa chỉ : 444 Hoang Hoa Tham, Hanoi, Viet Nam
Website : tailieuchung.com
Email : tailieuchung20@gmail.com
Tailieuchung.com là thư viện tài liệu trực tuyến, nơi chia sẽ trao đổi hàng triệu tài liệu như luận văn đồ án, sách, giáo trình, đề thi.
Chúng tôi không chịu trách nhiệm liên quan đến các vấn đề bản quyền nội dung tài liệu được thành viên tự nguyện đăng tải lên, nếu phát hiện thấy tài liệu xấu hoặc tài liệu có bản quyền xin hãy email cho chúng tôi.
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.